“In- Vitro, Evaluation the Effect of Silver Nanoparticles Capping by pyocyanin as Anticandida Agents Against Clinical Isolates Of Candida Species”” خارج الجسم الحي, تقييم دقائق الفضة النانوية المغطاة بالبايوسيانين كعوامل مضادة لخميرة المبيضات ضد بعض العزلات السريرية لأنواع خميرة المبيضات “مناقشة
by
قسم علوم الحياة
College of Science for Women
تضمّنت هذه الدراسة الحصول على عزلات سريرية من خميرة Candida albicans معزولة سريريًا من عينات مختلفة من كلا الجنسين ومن أعمار مختلفة كما تم عزل و تشخيص عزلات الزائفة الزنجارية Pseudomonas aeruginosa ، واستُخدم نوعين من الجسيمات النانوية وهما : جسيمات الفضة النانوية(AgNps) و(AgNps) المغلفـة بمستخلــص البايوسيانيـــن مـــن احــــدى عزلات بكتريا الزائفة الزنجارية P areuginosa. عالية الانتاج , حيث بلغت قيمة إنتاج البايوسيانين (١٠.٧ مايكروكرام/مل) في ظل ظروف انتاج مثالية .
تم تقييم تأثير المحاليل الغروية لكل من (AgNPs) و (PCN-AgNPs) بصورة منفصلة على خميرة C. albicans باستعمال طريقتي الانتشار في الآغار Agar Well Diffusion و طريقة الألواح الدقيقة Microtiter Plate (MTP) . كما حُدّدت قيمة التركيز المثبط الأدنى MIC للجسيمات (PCN-AgNPs) إذ بلغت (٢.٣٣ μg/ml) تجاه العزلات المقاومة مقارنةً بتأثير البايوسيانين غير المغلّف (PCN) ، الذي بلغ (٣.٤٤ μg/ml) . ويشير ذلك إلى فعالية الجسيمات المحضّرة في تثبيط نمو C. albicans وتقليل عوامل ضراوتها مثل إنتاج البروتياز وتكوين الأغشية الحيوية، وذلك في الاختبارات التي أُجريت على (٧) عزلات. وقد أظهرت النتائج انخفاضاً متفاوتاً في إنتاج البروتياز وتشكّل الأغشية الحيوية قبل وبعد المعاملة بالجسيمات النانوية. وكذلك تم تعريف هذا البيوسيانين المستخلص واختبار نشاطه البيولوجي قبل استخدامه في التجارب اللاحقة من خلال استخدام فحص (GC_MS). و لتوصيف البايوسيانين و جسيمات النانو الفضية المحضرة و جسيمات النانو الفضية المغلفة بالبايوسيانين تم اعتماد عدة تقنيات تحليلية شملت: TEM ، XRD, FE-SEM , FTIR ، و UV‒vis ، و AFM, تبين ان جسيمات النانوالفضية المغلفة بالبايوسيانين مادة مستقرة كيميائيًا، ذات جسيمات كروية شديدة التبلور، ويبلغ أقصى حجم حبيبي لها ٨٠.٧٢ نانومتر.
اوصت الدراسة بإمكانية إجراء تجارب مستقبلية لتحديد تأثير هذه الجزيئات النانوية المُحضَّرة مع صبغة البيوسيانين على التعبير الجيني لعوامل الضراوة في خميرة Candida albicans المقاوم وايضاً إمكانية استخدام المركبات النشطة المنقاة من البيوسيانين في تطبيقات أخرى في مجال التقنية النانوية، مثل حفظ الأغذية.
حصلت الباحثة على جيد جداً.
This study involved obtaining clinical isolates of Candida albicans from various samples collected from both genders and different age groups. Isolates of Pseudomonas aeruginosa were also isolated and identified. Two types of nanoparticles were used: silver nanoparticles (AgNPs) and AgNPs coated with pyocyanin extract (PCN-AgNPs) obtained from a highly productive P. aeruginosa isolate, where pyocyanin production reached 10.7 μg/ml under optimal production conditions.
The effect of the colloidal solutions of both AgNPs and PCN-AgNPs was evaluated separately against C. albicans using the Agar Well Diffusion method and the Microtiter Plate (MTP) method. The minimum inhibitory concentration (MIC) of PCN-AgNPs was determined to be 2.33 μg/ml against resistant isolates, compared to the effect of non-coated pyocyanin (PCN), which recorded 3.44 μg/ml. This indicates the effectiveness of the prepared nanoparticles in inhibiting the growth of C. albicans and reducing its virulence factors, such as protease production and biofilm formation, in tests performed on seven isolates. The results showed varying degrees of reduction in protease production and biofilm formation before and after treatment with the nanoparticles. Additionally, the extracted pyocyanin was characterized and its biological activity tested before being used in subsequent experiments through GC-MS analysis. To characterize pyocyanin, the prepared silver nanoparticles, and the pyocyanin-coated silver nanoparticles, several analytical techniques were employed, including TEM, XRD, FE-SEM, FTIR, UV–vis, and AFM. The results showed that the pyocyanin-coated silver nanoparticles were chemically stable, highly crystalline, spherical in shape, and had a maximum grain size of 80.72 nm.
The study recommends conducting future experiments to determine the effect of these synthesized nanoparticles combined with pyocyanin dye on the gene expression of virulence factors in resistant Candida albicans. It also recommends exploring the possibility of using purified active compounds of pyocyanin in other nanotechnology applications, such as food preservation.
Very Good.
