جمعت 100 عينة سريرية من حالات مرضية مختلفة شملت (البلغم Sputum، الادرار Urine ، الخروج Stool، القيح Pus، القصبة الهوائية Tracheal aspirate) من عدة مستشفيات تابعة لمدينة بغداد من الفترة 30/7/2023 ولغاية 30/9/2023. ولغرض التشخيص المظهري زرعت العينات على أطباق وسط الماكونكي الصلب MacConkey Agar ووسط الدم Blood agar ووسط الكرومايجين Chromagar ووسط الايوسين ميثيلين الازرق الصلب Eosin methylene blue agar. بعد اجراء التشخيص المجهري والاختبارات الكيموحيوية للعزلات البكتيرية، تم التأكد من تشخيصها بوساطة جهازالفايتك Vitek2، اذ تم الحصول على 50 عزلة بكتيرية تعود لبكتريا Klebsiella pneumoniae اعتمدت في هذه الدراسة. صنفت العزلات حسب مصادر عزلها، اذ شخصت 23 عزلة من البلغم بنسبة (46%) و22 عزلة من الادرار بنسبة (44%) ومن الخروج عزلتين بنسبة (4%) و3 عزلات من القيح والقصبة الهوائية بنسبة (6%).
أظهرت نتائج اختبار الحساسية بأستعمال جهاز الفايتك Vitek2 النسب المئوية لمقاومة المضادات الحيوية حيث كانت مقاومة عالية بنسبة 92% تجاه كل من مضادات Cefepime و Ceftazidime و Ciprofloxacin وLevofloxacin مع حساسية عالية تجاه كل من Piperacillin وTicarcillin/Clavulanic Acid وPiperacillin/Tazobactam بنسبة 96%. كما بينت نتائج الدراسة انها كانت مقاومة بنسبة 72% لمضاد Ceftriaxone وبنسبة مقاومة 72% للمضادينImipenem وMeropenem، كما أظهرت نتائج ايضا المقاومة للمضاد الحيويTrimethoprim/ Sulfamethoxazole بنسبة 68%، بينما ابدى المضاد الحيوي Tobramycinنسبة مقاومة 60% اما المضاد الحيوي Gentamicin فكانت نسبة المقاومة 56% والمضاد الحيوي Amikacin فكانت نسبة مقاومة 44% اما مقاومتها تجاه Aztreonam فكانت اقل نسبة 36%. وفقاً للنتائج اعلاه فقد عُدت جميع عزلات هذه الدراسة ذات مقاومة متعددة للمضادات الحيوية MDR لقدرتها على مقاومة ثلاث مضادات الى عشرة، فيما بلغت معدل نسبة العزلات المقاومة للأدوية بشكل واسع XDR هي 26%.
تم التحري عن قابلية عزلاتKlebsiella pneumoniae على انتاج الغشاء الحيوي Biofilm بالاعتماد على طريقة الصفيحة العيارية .Microtiter Plate (MTP) كانت نسبة انتاجها للغشاء الحيوي 100% لكن بشدة تكوين متفاوتة تراوحت بين القوية )52%( والمتوسطة 30)%( والضعيفة )18%(. وايضاً تمت دراسة بعض العوامل المؤثرة على إنتاج الغشاء الحيوي تضمنت الوسط الزرعي، درجة الحرارة، درجة الحموضة، مصادر الكاربون ومصادر النيتروجين. وأظهرت النتائج إن وسط نقيع القلب والدماغ السائل أفضل من وسط الأملاح السائل لإنتاج الغشاء الحيوي، في حين كانت درجة الحرارة 37ºم على وسط مرق الصويا المغذي ودرجة الحرارة 37ºم على وسط الأملاح السائل هي الأفضل في إنتاجية الغشاء وكانت درجة الحموضة عند 7pH= أفضل لإنتاجية الغشاء الحيوي وكما أظهرت النتائج إن أفضل المصادر الكاربونية لإنتاج الغشاء الحيوي هي سكر اللاكتوز والكلوكوز في حين كانت مصادر النيتروجين اللاعضوية هي الافضل في انتاجها للغشاءالحيوي مقارنة بمصادر النيتروجين العضوي وقد ثبط عنصري الحديد والكوبلت تكوين الغشاء الحيوي في البكتريا معنويا.
تم عزل العاثي البكتيري والبكتيريا المضيفة من الموقع نفسهُ. تم عزل عاثي من مياه نهر دجلة، بغداد، العراق بالقرب من الصرف الصحي لمستشفى الامامين الكاظمين (ع). تم اختبار الخصائص المورفولوجية والثبات الفيزيائي والكيميائي والنشاط التحللي والنشاط المضاد للأغشية الحيوية حافظ العاثي على ثباته عند درجات حرارة مختلفة (-10-60ºم) ولم يتم اكتشاف أي عاثي نشط أعلى من 60ºم. لتحقيق الاستقرار عند درجة حموضة مختلفة، كان العاثي البكتيري مستقر في قيم الرقم الهيدروجيني من 5 إلى 11 بالنسبة لتكوين الأغشية الحيوية، أظهرت العزلات السريرية قدرة متغيرة على تكوين الأغشية الحيوية، بينما أظهرت العاثي نشاطًا مضادًا للأغشية الحيوية ضد معظم العزلات السريرية التي تم اختبارها باستثناء المضيف، الذي ظل منتجًا ضعيفًا للغشاء الحيوي. تشير النتائج إلى أن العاثيات هي عامل مهم في علاج أو السيطرة على عدوى الالتهاب الرئوي. عن طريق تقديمها مزايا مختلفة مقارنة بالمضادات الحيوية كعوامل مضادة للأغشية الحيوية نظرًا لطبيعتها المحددة وغير السامة والمتعددة التكاثر والمحدودة ذاتياً. يعمل العاثي البكتيري على تحلل مصفوفة السكاريد الخارجية للأغشية الحيوية التي تعمل كحاجز للمضادات الحيوية وتصيب الكائنات الحية وتسبب خللًا واسع النطاق في الأغشية الحيوية.
تم الكشف عن بعض جينات المسؤولة عن تكوين الغشاء الحيوي شملت جينات MrkA و MrkD وأوضحت النتائج أن عشرة من العزلات المنتخبة كانت تمتلك جينات الغشاء الحيوي بنسبة 100%.