كلية التربية للعلوم الصرفة ( ابن الهيثم)

الكشف عن بعض أنواع الفطريات المرافقة للمرضى العراقيين الذين يعانون من مرض الكلى في المرحلة النهائية

by سندس صالح مهدي

Asia/Baghdad
بناية العمادة (قاعة المرحوم أ. سالم عبد الحميد)

بناية العمادة (قاعة المرحوم أ. سالم عبد الحميد)

Description

الخلاصة نُفذ البحث في قسم علوم الحياة / كلية التربية ابن الهيثم للعلوم الصرفة/ جامعة بغداد للفترة من 1 /2 /2023 لغاية 1/2 / 2024 ، هدفت الدراسة إلى الكشف عن الفطريات التي تصيب مرضى الكلى في المرحلة النهائية الخاضعين وغير الخاضعين للغسيل الكلوي والأصحاء وتشخيصها ومعالجتها مختبريًا ودراسة علاقتها ببعض الفحوص المناعية لمرضى الكلى . بينت نتائج العزل والتشخيص المظهري للفطريات المعزولة من 180 عينة دم من الأشخاص المصابين بمرض الكلى والأصحاء وجود أربعة أجناس هي Candida spp. ، Rhodotorula spp. ، Cryptococcus spp. و Aspergillus spp.، وأوضحت نتائج تشخيص أنواع Candida spp. تسجيل الأنواع C.albicans ، C. parapsilosis ، C.tropecalis و C.glabrata . وكشفت نتائج تشخيص الخمائر باستعمال نظام فايتك VITEK 2 ، إذ اختبر 59 عزلة منها 47 تعود لـ Candida spp. و 7 عزلات تعود لـ Rhodotorula spp. و5 عزلات تعود لـ Cryptococcus spp. ، إذ شُخصت أربعة أنواع من المبيضات احتل المرتبة الأولى النوع C. albicans بنسبة 46.80 % وجاء بالمرتبة الأخيرة النوع C.tropicallis بنسبة 6.38 % ، وظهر النوع R. mucilaginosa بنسبة 11.86 % و النوع C. neoformans بنسبة 8.47 % . وأوضحت نتائج اختبار عوامل الضراوة للـ Candida spp. قدرة الخميرة C. albicans على تكوين انبوب الإنبات والأبواغ الكلاميدية وعدم مقدرة بقية الأنواع على ذلك ، كما بينت النتائج قدرة الخميرة C. albicans و C. parapsilosis على النمو بدرجة حرارة 45 درجة مئوية في حين لم تنمو بقية الأنواع . كما بينت الدراسة الجزيئية لـ7 عزلات فطرية عن طريق تضاعف منطقة Internal transcribed spacer (ITS) إذ كان حجم الجين الذي تم مضاعفته هو 560 bp كما كشفت نتائج مقارنة تسلسلات القواعد النتروجينية مع العزلات المسجلة عالميًا في NCBI( National Center for Biotechnology Information ) فقد بينت أن 5 سلالات من 7 سلالات التي تم الحصول عليها في هذه الدراسة هي سلالات سُجلت لاول مرة في العراق عن طريق وجود طفرات في بعض القواعد النتروجينية، واوضح التشخيص الجزيئي للعزلات الفطرية ؛أنها تعود للأنواع الآتية : C. albicans، C. tropicalis ، C. glabrata و C. parapsilosis R. mucilaginosa ، C. neoformans و A. flavus وسُجلت هذه العزلات في NCBI تحت ارقام انضمام هي : OR820540, OR820558, OR821996, OR815974 OR815977, , OR815976 و OR815975 و على التوالي . كما أوضحت نتائج العزل والتشخيص للفطريات المعزولة من عينات دم مرضى الكلى في المرحلة النهائية غير الخاضعين للغسيل الكلوي ، الحصول على 26 عزلة فطرية تعود لستة أنواع هي : C. albicans ، C.glabrata، C. parapsilosis ، R. mucilaginosa ، C. neoformans و A. flavus ، أظهر جنس Candida spp. أعلى عدد عزلات إذ بلغت 13 عزلة . أما نتائج عينات المرضى الخاضعين للغسيل الكلوي فقد بلغ عدد العزلات 35 عزلة فطرية تعود لسبعة أنواع هي : C. albicans ، C.glabrata C.tropicallis ، C. parapsilosis ، R. mucilaginosa ، C. neoformans و A. flavus إذ بلغ عدد عزلات الـ Candida 23 عزلة . ومن جانب المرحلة العمرية وعلاقتها بالإصابات الفطرية في المرضى غير الخاضعين للغسيل الكلوي فقد إذ أظهرت النتائج أن المرحلة العمرية 21-30 سنة أقل المراحل العمرية اصابة بالفطريات اذ بلغت عزلة واحدة في حين كانت المرحلة العمرية61-70 سنة 6 عزلات و71-80 سنة أعلى عدد عزلات إذ بلغت 7 عزلات لكل مرحلة عمرية . أما في المرضى الخاضعين للغسيل الكلوي ، كان العمر 21-30 سنة أقل الأعمار اصابة بالفطريات إذ بلغت 2 عزلة في حين كان العمر 61-70 أعلى عدد عزلات إذ بلغت 9 عزلات، وفي الجانب نفسه في الأصحاء كشفت الدراسة عدم وجود أي اصابة فطرية للفئة العمرية أقل من 20 سنة في حين بلغت أقل عدد عزلات في المرحلة العمرية 41-50 سنة عزلة واحدة ، وأعلى عدد عزلات في عمر 51-60 إذ بلغت 5 عزلات . كما كشفت دراسة علاقة نوع الجنس بمرضى الكلى أن الإناث المصابات بمرض الكلى الخاضعات وغير الخاضعات للغسيل الكلوي أكثر اصابة بالفطريات من الذكور المصابين بمرضى الكلى الخاضعين وغير الخاضعين للغسيل الكلوي والتي بلغت عند الاناث 21 عزلة و 16 عزلة على التوالي . كما بينت نتائج زراعة الدم عن طريق زجاجة Bact/Alert لعينات مرضى الكلى غير الخاضعين للغسيل الكلوي إلى وجود 26 عزلة موجبة Positive(+) وبنسبة 43.33% و34 عزلة سالبة Negative(-) وبنسبة 56.66 % ، سُجلت اعلى عدد للعزلات هي C.albicans و A. flavus والتي بلغت 6 عزلات ، وسجلت C. neoformans بأقل عزلات، والتي بلغت 2 عزلة ، وأما نتائج علاقة فترة الغسل بعدد العزلات الفطرية فبينت النتائج إن أكثر العزلات الفطرية التي تم الحصول عليها كانت في فترات الغسل الكلوي التي أقل من 3 سنوات ، أقل من 4 سنوات وأقل من 5 سنوات والتي بلغت 7عزلات . وكشفت نتائج دراسة تقييم فعالية أربعة مضادات فطرية هي Amphotericin-B، Ketoconazole ، Nystatin و Clotrimazole ضد الـ 7 أنواع فطرية أن المضاد الفطري Clotrimazole أنه أفضل المضادات المستعملة في هذه التجربة إذ كانت العزلات المختبرة حساسة جميعها لهذا المضاد مع أقطار تثبيط عالية إذ بلغ أعلى متوسط قطر تثبيط هو 40 ملم وكما بينت النتائج أن أقل معدل قطر تثبيط كان 8 ملم مع المضاد Ketoconazole اتجاه الفطرC. albicans وفيما يخص الدراسة المناعية فقد كشفت نتائج الفحوص المناعية وجود فروق معنوية في الفحوصات المدروسة جميعها (انترلوكين 6 ، انترلوكين 4 ، عامل النمو المحول بيتا والفيرتين ) ، إذ بينت النتائج أن أعلى تراكيز للمستويات المناعية كان في المرضى الخاضعين للغسيل الكلوي و للفحوصات جميعها ، إذ بلغت التراكيز (7.08±119.58 ، 2.58±37.84 ،4.02±59.95 و 40.97±637.86 ) pg/ml على التوالي ، وأن أدنى تركيز للمستويات المناعية كان في المرضى غير الخاضعين للغسيل الكلوي (4.32±93.73 ، 2.16±30.95، 2.79±42.99 و 6.54±226.08 ) pg/ml مقارنة بالسيطرة ( الأصحاء) (3.05±88.23 ،1.40±24.09 ، 2.38±25.63 و 10.56±147.45) pg/ml وعلى التوالي ، وفيما عدا عامل النخر TNF-α الذي ارتفع تركيزه في المرضى غير الخاضعين 4.50±104.95 pg/ml عن المرضى الخاضعين للغسيل الكلوي، إذ بلغ تركيزه 4.49±67.79 pg/ml مقارنة بالسيطرة 44.47±2.26 pg/ml ، كما بينت الدراسة المناعية وحسب بعض المتغيرات ،أن هنالك تناسبًا طرديًا بين الفحوص المناعية المدروسة و الإصابات الفطرية والمراحل العمرية ونوع الجنس، إذ ارتفعت تراكيز الفحوص جميعها مع زيادة عدد العزلات والاصابات الفطرية والنسبة المئوية للتردد بالنسبة للذكور و الإناث مابين المرضى غير الخاضعين والخاضعين للغسيل الكلوي والأصحاء وكشفت النتائج أن أعلى قيمة لتراكيز المستويات المناعية المدروسة كانت لها علاقة بالفطر Candida spp. كما أن أدنى قيمة و للتراكيز المناعية جميعها علاقة بالفطر R. mucilaginosa وكالآتي ، إذ بلغ أعلى تركيز للـ IL-6 3.84±179.70 pg/ml و أدنى تركيز 1.17±55.71 pg/ وكلاهما في المرضى الخاضعين للغسيل الكلوي، كما بلغ أعلى تركيز IL-4 هو 1.62±77.38 pg/ml في المرضى الخاضعين للغسيل بينما أدنى تركيز كان في المرضى غير الخاضعين للغسيل الكلوي إذ بلغ 2.02±16.29 pg/ml ، كما بلغ اعلى تركيز للـ TNF-α 14.36±145.50 pg/ml وأدنى تركيز 12.78±40.10 وكلاهما في المرضى الخاضعين للغسيل الكلوي وبلغ أعلى تركيز للـ TGF-β 3.62±82.27 pg/ml وأدنى تركيز 14.90±16.55 pg/ml وكلاهما في المرضى الخاضعين للغسيل الكلوي ، كما بلغ اعلى تركيز للـ Ferritin 70.46±631.62 pg/ml وأدنى تركيز 84.00±136.00 pg/ml وكلاهما في المرضى الخاضعين للغسيل الكلوي .